Стол для окраски мазков
Обновлено: 17.06.2024
Техника окраски мазков. Для окраски мазков пользуются растворами красок или красящей бумагой, что предложено А.И. Синевым. Простота приготовления, удобство применения, а также возможность хранения красящей бумаги в течение неограниченно долгого времени явились основанием для широкого их использования при различных способах окраски.
Окраска мазков красящей бумагой. На высушенный и фиксированный препарат наносят несколько капель воды, кладут окрашенные бумажки величиной 22 см. В течение всего времени окрашивания бумага должна оставаться влажной и плотно прилегать к поверхности стекла. При подсыхании бумагу дополнительно смачивают водой. Продолжительность окрашивания мазка определяется методом окраски. По окончании окраски бумагу осторожно снимают пинцетом, а мазок промывают водопроводной водой и подсушивают на воздухе или фильтровальной бумагой.
Окраска мазков растворами красителей. На высушенный и фиксированный препарат пипеткой наносят краситель в таком количестве, чтобы он покрывал весь мазок. При окраске мазков концентрированными растворами красителей (карболовый фуксин Циля, карболовый генциановый или кристаллический фиолетовый) окрашивание производят через фильтровальную бумагу, задерживающую частицы красителя: на фиксированный мазок кладут полоску фильтровальной бумаги и на нее наливают раствор красителя.
Для микроскопического исследования приготовленные мазки, высушенные и зафиксированные, подвергают окраске. Окраска бывает простая и сложная. Простая окраска заключается в нанесении на мазок какой-либо одной краски на определенный промежуток времени. Чаще всего для простой окраски применяют спирто-водный (1:10) фуксин Пфейффера, леффлеровскую метиленовую синьку и сафранин. Эозин, как кислая краска, употребляется только для окраски цитоплазмы клеток и подкраски фона. Кислый фуксин совершенно непригоден для окраски бактерий.
При простой окраске микробные тела воспринимают цвет применяемой краски так же интенсивно, как и ядра клеток; в то же время цитоплазма и весь фон мазка (если это не мазок из чистой культуры) окрашиваются в тот же цвет, но несколько бледнее. Фуксин и генцианвиолет относятся к более интенсивно окрашивающим краскам; метиленовая синька окрашивает значительно бледнее. Восприятие окраски зависит не только от свойств красок, но и от свойств подвергаемых окраске микробов. Большинство микробов легко и быстро окрашивается водными или спирто-водными растворами красок.
Для трудно воспринимающих окраску микробов (например, возбудитель туберкулеза) или их частей (споры, жгутики и пр.) приходится применять более интенсивные (форсированные) методы окраски.
Форсировать окраску можно: а) повышением красящей способности основных красок, б) удлинением срока окраски и в) действием протрав.
Для повышения красящей способности воздействуют на краску высокой температурой (нагреванием) до появления паров (вплоть до кипения). Варьируя степень нагревания, можно получать различные степени силы окраски.
Удлинение срока воздействия красящего раствора на объект также может в известной мере усилить степень окраски.
Протравами являются вещества, облегчающие проникновение краски внутрь клеток: фенол, танин, уксусная и хромовая кислоты, щелочи и др. Механизм действия протрав различен: в одних случаях протравы действуют на краски, в других—на способность клеток к восприятию окраски. Протравами воздействуют на мазок или перед действием краски (например, при окраске жгутиков), или совместно с краской (фенол в фуксине Циля), или же после действия краски (люголевский раствор в методе Грама).
При окраске мазков, кроме красок, применяются еще так называемые обесцвечивающие или раскрашивающие вещества. Последние служат для удаления излишка краски из всей микробной клетки или же из ее части при слишком энергичной адсорбции краски материалом или при перекрашивании его с применением нагревания и т. п.
В качестве обесцвечивающих веществ применяются: спирт, 5% водный раствор серной кислоты, 20—30% водный раствор азотной кислоты, 3% раствор соляной кислоты в абсолютном алкоголе и др.
Для окраски мазков необходимо иметь на рабочем столе набор красящих растворов во флаконах (лучше оранжевого стекла) с пипетками и резиновыми баллончиками. Флаконы должны быть снабжены этикетками с соответствующими обозначениями; во избежание быстрого загрязнения красками этикетки рекомендуется пропитывать расплавленным парафином (при помощи кисточки). Флаконы с красками помещают в деревянный штатив - колодку (рис. 2).
Рис. 2. Флаконы для красок
Для смывания красок и ополаскивания мазков необходимы бутыль с тубусом на подставке для дистиллированной воды и кристаллизатор (сливная чашка) с подставкой-мостиком для мазков. Подставка-мостик представляет собой две стеклянные трубки или палочки, соединенные на концах отрезками резиновых трубок. Ширина подставки должна быть меньше длины предметного стекла. Кроме того, для окраски мазков необходимы спиртовая (или газовая) горелка и пинцет Корнэ для предметных стекол. При окраске с подогреванием предметное стекло захватывают пинцетом и выдерживают определенное время над пламенем. При продолжительной окраске употребляют кюветки или небольшие стаканчики, куда наливают краску и погружают в нее мазок. При одновременной окраске в кюветке нескольких мазков, для того, чтобы стекла не слипались, их соединяют по два намазанной стороной наружу и укрепляют резиновыми кольцами, нарезанными из трубок. После окраски мазки промывают водой и тщательно высушивают фильтровальной бумагой.
Работами последних лет выявлена возможность сохранения при окраске жизнеспособности микробов, главным образом, спороносных. Поэтому необходима достаточная фиксация мазков. Промывные воды (при окрасках) нужно сливать в специальный сосуд с последующим обезвреживанием, отработанную фильтровальную бумагу (после просушки мазков) не выбрасывать, а сжигать, использованные мазки дезинфицировать.
IV. ОРГАНИЗАЦИЯ РАБОЧЕГО МЕСТА И ОБОРУДОВАНИЕ ДЛЯ МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ
В лабораториях, функции которых ограничены только
микроскопическим исследованием мазков из нативного материала,
рекомендуется использовать световую микроскопию.
Микроскопическое исследование на кислотоустойчивые микобактерий должно проводиться в отдельной комнате с соблюдением правил безопасности и поточности движения и обработки материала. В объединенных клинико-диагностических лабораториях для микроскопических исследований на кислотоустойчивые микобактерий должно выделяться отдельное помещение. Стены, потолки и полы должны быть покрыты гладким, не адсорбирующим материалом, который можно легко мыть и дезинфицировать. Кроме того, этот материал должен быть устойчивым к химическим реактивам, используемым в лаборатории. Пол не должен быть скользким, межкомнатные пороги отсутствовать. Необходимо достаточное освещение.
В помещении для микроскопии должно быть четыре зоны:
I. Зона для приема и регистрации диагностического материала:
1. Окно для приема образцов;
2. Рабочий стол для осмотра, дезинфекции и последующей
регистрации поступающих образцов;
3. Полка для хранения бланков с результатами анализов.
II. Зона для приготовления и окраски мазков:
4. Стол для приготовления мазков (желательно под вытяжкой или
в боксе с наличием вытяжного устройства);
5. Контейнер для отработанных инфекционных материалов;
6. Лабораторная раковина для окрашивания мазков;
7. Вспомогательный рабочий стол для сушки мазков.
III. Рабочее место для микроскопии:
8. Стол для микроскопии;
9. Раковина для мытья рук.
IV. Место для регистрации результатов исследований:
10. Стол для учета и регистрации результатов исследований;
11. Рабочий стол и весы;
12. Шкаф для посуды и реактивов.
Помещение должно иметь, по крайней мере, 2 раковины (или одну раковину с двумя отделениями — для окраски мазков и для мытья рук) и четыре стола или 4 изолированных рабочих места.
Столы должны быть удобными для работы. Рабочие поверхности должны быть широкими, гладкими, легко обрабатываться и дезинфицироваться, быть устойчивыми к применяемым химическим веществам.
В лаборатории должны использоваться стулья, высоту сиденья которых можно регулировать.
Необходимо иметь достаточно места для хранения реактивов и архива исследованных мазков.
Доступ в лабораторию должны иметь только ее сотрудники. Диагностический материал поступает в лабораторию через окно для приема на специальный стол. На этом столе должен иметься специальный легко дезинфицируемый лоток, на котором производят осмотр флаконов с материалом. При наличии следов протечки необходимо уничтожить (автоклавирование или кипячение) поврежденный флакон, продезинфицировать обнаруженные вне его следы протечки и запросить новый образец, сделав отметку в сопроводительном бланке.
По завершении приема материала, проверки правильности маркировки поступивших образцов и ее соответствия данным направлений и сопроводительных документов соответствующую информацию вносят в регистрационный лабораторный журнал. Затем материал передают в основную рабочую зону для приготовления мазков.
Место для микроскопии включает рабочий стол с микроскопом.
По завершении микроскопического исследования в следующей зоне лаборатории результаты микроскопии заносят в лабораторный регистрационный журнал и в специальные бланки результатов анализа.
Бланки с результатами анализов передают в зону приема материала, откуда они передаются в соответствующие подразделения или учреждения, направившие материал для исследования.
Рекомендуемый список оборудования, реактивов и расходных
материалов, необходимых для работы лабораторий, осуществляющих прямую микроскопию мазка с окраской по Ziehl-Neelsen или флюорохромными красителями, представлен в Приложении № 1 настоящей инструкции.
Станция ручного окрашивания образцов
Простота и экономичность окрашивания образцов для гистологических и цитологических исследований.
Компанией производителем предоставляются две модели, которые в зависимости от требований покупателя включают в себя на выбор 3 или 12 емкостей для ручного окрашивания.
Краткое сравнение представленных моделей
| Код | Описание | Размеры / упаковка |
| 10-10 | Набор для цитологии и гистологии на 12 емкостей для окрашивания | 735 мм × 125 мм |
| 10-20 | Набор для гематологии на 3 емкости | 225 мм × 125 мм |
| 10-30 | Емкости для окрашивания | 12 емкостей в упаковке |
| 10-33 | Емкости для окрашивания с отдельной крышкой (для старых моделей наборов) | 12 емкостей в упаковке |
| 10-42 | Держатель для 25 стекол с пластиковой ручкой | 6 держателей в упаковке |
Крепление емкостей вне зависимости от модели изготавливается из простой в очистке и устойчивой к воздействию кислот и растворителей, нержавеющей стали. Достаточно простая и прочная конструкция позволяет легко переместить изделие двумя руками. В комплект набора входят: металлическое основание, емкости для окрашивания, по 300 мл каждая(код 10-30) с плотно закрывающимися удобными крышками и держателями для 25 стекол (код 10-42).
Емкости для окрашивания (код 10-30)
Представленные на рис.2 и изготовленные из ПЭТ-Ф (Полиэтилентерефталат) и усиленные волокнами стеклоткани, емкости для окрашивания устойчивы к воздействию растворителей, специализированно используемых в гистологических лабораториях (например: Толуол, Ксилол, “Bio-Clear” и т.д.). Данные емкости устойчивы к воздействиям температур в диапазоне от 0 до +170°С и могут быть использованы для иммуногистохимических исследований. Емкости (300 мл - каждая) изготавливаются с удобными откидными крышками. Они окрашены в голубой цвет и поставляются в упаковках по 12 штук.
Держатель для образцов (код 10-42)
Рассчитаны на одновременное окрашивание до 25-ти стекол, изготовлены из ПЭТ-Ф, устойчивы к кислотам, растворителям и высоким температурам. Ручка кассеты немного возвышается над установленными стёклами с образцами, что обеспечивает наибольшее удобство при захвате и одновременно позволяет крышке емкости закрываться полностью Рис.3. Эта особенность позволяет избежать испарения и проливания реагентов. Поставляются в упаковках по 6 штук.
Основные характеристики ПЭТ-Ф
Полиэтилентерефталат армированный волокнами стеклоткани — это полиэстер, термопластическая смола, используемая благодаря следующим свойствам:
- высокая электро-, и химостойкость
- стойкость к высоким температурам и простота придания необходимой формы на производстве.
Кроме того, добавление стекловолокна улучшает износостойкость материала. Он выдерживает многократное автоклавирование даже при 150° C.
В лабораториях, функции которых ограничены только микроскопическим исследованием мазков из нативного материала, рекомендуется использовать световую микроскопию. Микроскопическое исследование на кислотоустойчивые микобактерии должно проводиться в отдельной комнате с соблюдением правил безопасности и поточности движения и обработки материала. В объединенных клинико-диагностических лабораториях для микроскопических исследований на кислотоустойчивые микобактерии должно выделяться отдельное помещение. Стены, потолки и полы должны быть покрыты гладким, не адсорбирующим материалом, который можно легко мыть и дезинфицировать. Кроме того, этот материал должен быть устойчивым к химическим реактивам, используемым в лаборатории. Пол не должен быть скользким, межкомнатные пороги отсутствовать. Необходимо достаточное освещение.
I. Зона для приема и регистрации диагностического материала:
2. Рабочий стол для осмотра, дезинфекции и последующей регистрации поступающих образцов;
3. Полка для хранения бланков с результатами анализов.
II. Зона для приготовления и окраски мазков:
4. Стол для приготовления мазков (желательно под вытяжкой или в боксе с наличием вытяжного устройства);
III. Рабочее место для микроскопии:
IV. Место для регистрации результатов исследований:
Помещение должно иметь, по крайней мере, 2 раковины (или одну раковину с двумя отделениями - для окраски мазков и для мытья рук) и четыре стола или 4 изолированных рабочих места.
Рекомендуемый список оборудования, реактивов и расходных материалов, необходимых для работы лабораторий, осуществляющих прямую микроскопию мазка с окраской по Ziehl-Neelsen или флюорохромными красителями, представлен в Приложении N 1настоящей инструкции.
Бактериологическая лаборатория
Бактериологические лаборатории как структурные единицы организуются в составе областных, районных, межрайонных ветеринарных лабораториях, а также в структуре зональных ветеринарных лабораторий. Они также организованы при центрах санитарно-эпидемиологического надзора, в инфекционных больницах, больницах общего типа, некоторых специализированных стационарах (например, в туберкулезных, ревматологических, кожно-венерологических), и в поликлиниках. Бактериологические лаборатории входят в состав специализированных научно-исследовательских учреждений. Бактериологические лаборатории постоянно используются для подтверждения или установления оценки пригодности мяса на пищевые цели по ВСЭ.
Объектами исследования в бактериологических лабораториях являются:
Выделения из организма: моча, кал, мокрота, гной, а также кровь, патологический и трупный материал.
Объекты внешней среды: вода, воздух, почва, смывы с предметов инвентаря, корма, технологическое сырьё получаемое от убоя сельскохозяйственных животных.
Продукты питания, образцы мяса и мясопродуктов, молока и молокопродуктов, которым необходимо дать оценку на пригодность для пищевых целей.
Помещение бактериологической лаборатории и оборудование рабочего места
Специфика микробиологических работ требует, чтобы помещение, отведенное под лабораторию, было изолировано от жилых комнат, пищевых блоков и других непрофильных производственных помещений.
В состав бактериологической лаборатории входят: лабораторные комнаты для бактериологических исследований и подсобные помещения; автоклавная или стерилизационная для обеззараживания отработанного материала и зараженной посуды; моечная, оборудованная для мытья посуды; бактериологическая кухня – для приготовления, разлива, стерилизации и хранения питательных сред; виварий для содержания подопытных животных; материальная для хранения запасных реактивов, посуды, аппаратуры и хозяйственного инвентаря.
Перечисленные подсобные помещения как самостоятельные структурные единицы входят в состав крупных бактериологических лабораторий. В небольших лабораториях бактериологическую кухню и стерилизационную объединяют в одной комнате; специальное помещение для содержания подопытных животных отсутствует.
Помещения микробиологических лабораторий по степени опасности для персонала разделяются на 2зоны:
I. "Заразная" зона - помещение или группа помещений лаборатории, где осуществляются манипуляции с патогенными биологическими агентами и их хранение,персонал одет в соответствующий тип защитной одежды.
II. "Чистая" зона - помещения, где не проводят работу с биологическим материалом, персонал одет в личную одежду.
Под лабораторные комнаты, в которых производят все бактериологические исследования, отводят наиболее светлые, просторные помещения. Стены в этих комнатах на высоту 170 см от пола окрашивают в светлые тона масляной краской или покрывают кафелем. Пол застилают релином или линолеумом. Такого рода отделка позволяет пользоваться при уборке помещения дезинфицирующими растворами.
В каждой комнате должна быть раковина с водопроводной подводкой и полкой для бутыли с дезинфицирующим раствором.
В одной из комнат оборудуют застекленный бокс - изолированное помещение с тамбуром (предбоксником) для выполнения работ в асептических условиях. В боксе ставят стол для посевов, табурет, над рабочим местом монтируют бактерицидные лампы. В предбокснике помещают шкаф для хранения стерильного материала. Окна и двери помещений "заразной" зоны должны быть герметичными. Имеющаяся вытяжная вентиляция из "заразной" зоны должна быть изолирована от других вентиляционных систем и оборудована фильтрами тонкой очистки воздуха.
Лабораторное помещение оборудуется столами лабораторного типа, шкафами и полками для хранения необходимой при работе аппаратуры, посуды, красок и реактивов.
Очень большое значение для работы имеет правильная организация рабочего места врача-бактериолога и лаборанта. Лабораторные столы устанавливают около окон. При размещении их нужно стремиться к тому, чтобы свет падал спереди или сбоку от работающего, лучше с левой стороны, но ни в коем случае не сзади. Желательно, чтобы комнаты для проведения анализов, особенно для микроскопирования, имели ориентацию окон на север или северо-запад, так как для работы необходим ровный рассеянный свет. Освещенность поверхности столов для работы должна быть 500 лк. Для удобства дезинфекции поверхность лабораторных столов покрывают пластиком или обивают железом. За каждым сотрудником лаборатории закрепляют отдельное рабочее место размером 15060 см.
Все рабочие места оборудуют предметами, необходимыми для повседневной бактериологической работы, перечень которых дан в таблице .
Читайте также: